酶標(biāo)儀（Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是一種常用的生物化學(xué)分析技術(shù)，用于檢測和測量樣品中的特定物質(zhì)（如蛋白質(zhì)、抗原、抗體等）的存在和濃度。它的用途廣泛，包括醫(yī)學(xué)診斷、生物學(xué)研究、食品安全監(jiān)測等領(lǐng)域。

　　酶標(biāo)儀的工作原理基于酶的催化作用和免疫反應(yīng)原理。下面是酶標(biāo)儀的基本工作原理：

　　1. 固定：首先，在試驗(yàn)板或試管的表面上涂覆目標(biāo)物質(zhì)（如抗原或抗體）。這樣，當(dāng)樣品中的特定物質(zhì)與其相結(jié)合時(shí)，它們將被固定在試驗(yàn)板或試管的特定位置上。

　　2. 結(jié)合：接下來，將待測樣品加入試驗(yàn)板或試管中，樣品中的特定物質(zhì)（如抗體）與固定在試驗(yàn)板上的目標(biāo)物質(zhì)（如抗原）發(fā)生特異性的結(jié)合。

　　3. 洗滌：為了去除未結(jié)合的物質(zhì)，需要進(jìn)行洗滌步驟。洗滌液通過試驗(yàn)板或試管，將未結(jié)合的物質(zhì)洗掉，只留下特異性結(jié)合的物質(zhì)。

　　4. 檢測：然后，加入與待測物質(zhì)特異性結(jié)合的酶標(biāo)記反應(yīng)物（如辣根過氧化物酶-HRP），它與特異性結(jié)合的物質(zhì)結(jié)合在一起。

　　5. 底物添加：加入底物，底物被酶標(biāo)記反應(yīng)物催化，產(chǎn)生可測量的信號(hào)。常見的底物是類似于四氫吡啶-2-酮（TMB）的物質(zhì)，它與HRP催化反應(yīng)后會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色或黃色的產(chǎn)物。

　　6. 反應(yīng)停止：在發(fā)生足夠的顏色反應(yīng)后，通過添加停止液（如硫酸或酸性溶液）停止酶催化反應(yīng)。

　　7. 讀?。?后，使用酶標(biāo)儀測量反應(yīng)產(chǎn)物的光密度或顏色。光密度或顏色的強(qiáng)度與待測物質(zhì)的濃度成正比，通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，可以確定待測樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。

　　總結(jié)起來，酶標(biāo)儀通過特異性結(jié)合、酶催化和光密度或顏色測量等步驟，實(shí)現(xiàn)了對(duì)待測物質(zhì)的檢測和測量。它的工作原理簡單而靈敏，使其成為許多生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。